مراحل كار:

1- توسط پيپت 1cc به ميزان  1cc از سرم فيزيولوژي به چهار لوله شيشه اي اضافه نمائيد.

2-توسط ميكرو پيپت 50x از سرم فيزيولوژي هر يك از لوله ها برداشته و 50x از نمونه بيمار به لوله ها اضافه نمائيد .

3- لوله ها را به عنوان سوسپانسيون %2-5 به نامهاي A-B-D علامتگذاري نمائيد .

4- يك قطره آنتي سرم A در لوله A و يك قطره آنتي سرم B در لوله B و يك قطره آنتي سرم D در لوله D  بريزيد .

5-  به هرکدام از لوله ها يک قطره سوسپانسيون 5-2% بيمار اضافه نماييد

6- محتويات لوله ها را به آرامي مخلوط نمائيد .

7- لوله ها را به مدت 30-15 ثانيه در حدود 1000rpm سانتريفيوژ نمائيد .

8- بازدن ضربه آرام به انتهاي لوله ها آنها را از نظر آگلوتيناسيون بررسي نمائيد .

تفسير نتايج :

نتايج مثبت : آگلوتيناسيون يا هموليز در هر لوله دلالت بر نتيجه مثبت دارد .

نتايج منفي : عدم وجود اگلوتيناسيون يا هموليز و حضور يك سپانسيون يكنواخت R.B,C بيانگر نتيجه منفي آزمايش است .

نتايج اينتر مديت :  هر اختلاف در واكنش ها بايد بوسيله انجام آزمايشات بيشتر حل شود .

براي موارد Rh منفي مي بايست تست تائيدي Du انجام شود .

 

تعيين گروه خوني ABO  با كاربرد لوله به روش Back type

هدف : بررسي حضور آنتي باديهاي متقابل گروههاي خوني كه در بيمار وجود ندارد.

تجهيزات : لوله شيشه اي – سوسپانسيونهاي 5-2 % گروههاي خوني A,B -سانتريفيوژ – ماژيك – ميكروپيپت 50لاندا - سرم بيمار .

روش انجام كار :

1-             ابتدا نمونه خون بيمار را جهت تهيه سرم در دور 3500rpm به مدت 10-5 دقيقه سانتريفيوژ نمائيد ( نمونه خون كاربردي خون بدون ضد انتقاد )

2- سرم بيمار را جدا نمائيد .

3- لوله را با نامهاي A,B  علامتگذاري كنيد .

4- به هر كدام از لوله ها 50 لاندا از سرم بيمار را توسط ميكروپيپت اضافه نمائيد .

5- از سوسپانسيونهاي 5-2% خوني مشخص به لوله 50 – A لاندا از سوسپانسيون A و به لوله B  50 لاندا از سوسپانسيون B اضافه نمائيد .

6- لوله ها را به مدت 30-15 ثانيه در دور 1000 rpn سانتريفيوژ نمائيد .

7- لوله ها را با زدن ضربه انتهاي به حالت سوسپانسيون در آمده و از نظر آگلوتيناسيون بررسي نمائيد .

تفسير نتايج :

نتيجه مثبت : با مشاهده اگلوتيناسيون و به هم چسبندگي سلولهاي R.B.C

نتيجه منفي : با عدم مشاهده اگلوتيناسيون حضور سوسپانسيون يكنواخت R.B.C

نتيجه مثبت : لوله A بيانگر حضور Anti-a در سرم بيمار و معرف گروه خوني B مي باشد .

نتيجه مثبت : لوله B بيانگر حضور Anti-a در سرم بيمار و معرف گروه خوني A مي باشد . 

نتيجه مثبت : هر دو گروه خوني بيانگر گروه خوني O مي باشد .

نتيجه منفي : هر دو لوله تست بيانگر گروه خوني AB مي باشد .